-
Telefon
+86-0755 2308 4243
-
Adresa
Pokoj 309, Meihua Building, Taiwan Industrial Park, No.2132 Songbai Road, Bao'an District, Shenzhen, Čína
-
E-mail
Peptidový konjugát s nosnými proteiny (KLH, BSA a OVA)
Krátké peptidy jsou obvykle příliš malé na to, aby vyvolaly dostatečnou imunitní odpověď. Proto je nutné konjugovat peptid s větším nosným proteinem, aby se podpořila silná imunitní odpověď a vytvořily se vysoké hladiny specifických protilátek. Biorunstar poskytuje následující nejběžněji používané nosné proteiny pro peptidové konjugáty:
KLH (keyhole limpet hemocyanin, MW 4,5 × 10⁵ - 1.3 × 10⁷ Da) je protein obsahující měď- izolovaný zMegathura crenulataa je obecně -první volbou nosného proteinu kvůli své vysoké imunogenicitě. Peptidy konjugované s KLH mají často omezenou rozpustnost ve vodě kvůli velikosti a struktuře proteinu; to však neovlivňuje jeho imunogenicitu a zakalené roztoky lze stále používat pro imunizaci.
BSA (bovinní sérový albumin, MW 67 × 10³ Da) je oblíbeným nosným proteinem pro slabě antigenní sloučeniny díky svým dostupným lysinovým zbytkům. BSA je menší, je rozpustnější ve vodě- než KLH a běžně se používá v imunotestech. Protože se však BSA často používá k blokování nespecifické vazby, neměly by se konjugáty BSA používat k imunizaci, pokud testovací systém používá BSA, protože to může vést k falešným pozitivním výsledkům kvůli protilátkám proti BSA v antiséru.
OVA (ovalbumin, MW 45 × 10³ Da) je protein izolovaný z kuřecích vajec. Běžně se používá jako kontrolní nosný protein k ověření, že protilátky jsou specifické spíše pro cílový peptid než pro nosný protein (např. KLH/BSA).

Obecně platí, že výběr konjugační chemie závisí na poskytnuté sekvenci antigenního peptidu.
|
Sekvence obsahuje/ Místo reakce |
Chemie |
Komentáře |
|
Volná -skupina NH2 |
glutaraldehyd |
①Doporučte N-koncovku bez NH2, pokud je to možné, vyhněte se Lys nebo Pro N{2}}konci ve vnitřní sekvenci ②Antigenní peptidová sekvence pochází z C-terminální nebo vnitřní oblasti proteinu |
|
Volná -skupina COOH |
EDCI |
①Doporučte COOH bez C-terminálu, pokud je to možné, vyhněte se Glu nebo Asp ve vnitřním pořadí ②Antigenní peptidová sekvence pochází z N-koncové nebo vnitřní oblasti proteinu |
|
Volná -skupina SH |
MBS/SMCC |
Běžně používaný přístup, obvykle prostřednictvím přidání dalšího Cys do sekvence buď na N- nebo C{1}}konci |