Hybridoma Fusion And Selection Medium (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基（HAT）

产品信息 Popis produktu

产品名称

Název produktu

杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

Hybridoma Fusion and Selection Medium (HAT)

货号 Kat.č

BRS-MED01

规格

Specifikace

500 ml/cca

500 ml / láhev

产品组分

Komponenty

DMEM 基础培养基:80 % (体积比)

Základní médium DMEM: 80 % (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Importované fetální bovinní sérum (FBS): 10 % (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Kondicionované médium: 10 % (v/v)

青霉素:100 单位/ml

Penicilin: 100 U/ml

链霉素:100 单位/ml

Streptomycin: 100 U/ml

次黄嘌呤 (Hypoxanthin): 100 uM

Hypoxanthin: 100 uM

胸腺嘧啶核苷(thymidin):16uM

Thymidin: 16 uM

氨基蝶呤 (aminopterin): 0,4 uM

Aminopterin: 0,4 uM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Další aditiva: Různé cytokiny (dostatečné množství) a doplňky

保存条件

Podmínky skladování

-20 stupňů 保存, 有效期 18 个月.

Skladujte při -20 stupních. Trvanlivost: 18 měsíců.

使用方法

Návod k použití

培养基融化:

37 stupňů 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5min使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Rozmrazování média:

Rozmrazte médium ve vodní lázni o teplotě 37 stupňů. Otřete vnější povrch 70% etanolem a umístěte jej do biologické bezpečnostní skříně k použití.
Poznámka: Vzhled malého množství bílého vločkovitého materiálu po rozmrazení je normální. Nechte médium 3–5 minut odstát, aby se vločky usadily na dně, poté opatrně shromážděte supernatant k použití.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)钌体积 (推荐:200ul/孔)9 stupeň 5% CO2 培养箱静置培养.

Buněčná fúze a naočkování:

Proveďte buněčnou fúzi pomocí fyzikálních (elektrofúze) nebo chemických (konvenční PEG) metod. Resuspendujte fúzované buňky přímo v tomto médiu ve vhodné hustotě a objemu:

Elektrofúze: 1 x 104 – 2 x 104 buněk/jamka

PEG fúze: 5 x 104 – 1 x 105 buněk/jamku
Doporučený objem: 200 µl/jamku v 96jamkové destičce.
Pro kultivaci inkubujte při 37 stupních, 5 % CO₂.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Střední náhrada:

Ve dnech 4–8 po -fúzi proveďte částečnou nebo úplnou výměnu média podle stavu růstu buněk.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Screening klonů:

Když buněčné klony v jamkách dosáhnou vhodné velikosti, proveďte pozitivní klonový screening.

注意事项

Opatření

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Tento produkt je toxický a je určen pouze pro selekci a kultivaci hybridomových buněk. Nesmí se používat pro kultivaci živých zvířat, diagnostické účely nebo terapeutické aplikace.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1, SP2/0).

Tento produkt je vhodný pro selekci a kultivaci hybridomových buněk pomocí selekčního systému HGPRT. Neplatí pro TK nebo jiné systémy výběru. Toto médium nelze použít pro přímou kultivaci HGPRT-deficientních buněk (např. NS1, SP2/0).

本产品为无菌溶液,pH 为 7,2~7,4,取用需在无菌条件下进行.

Tento produkt je sterilní roztok s pH 7,2–7,4. Veškerá manipulace musí být prováděna za aseptických podmínek.